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细胞培养微生物实验室环境设计

作者:微生物实验室 发布于:2019-07-11 10:11:51 点击量:809

  微生物实验室设计

  细胞培养物是无菌技术,需要的工作环境和条件必须确保没有微生物污染和影响从其它有害因素。细胞培养室和设计原则是,以防止微生物污染,有害因素,所需的工作环境清洁,空气清新,烟雾和非干燥。设计原则细胞培养室在内部腔室的无菌区域通常设置步行距离较短,在正常操作,并在一个封闭的腔室中培养,并进一步洗涤消毒室。

  公共设施和设备

  洁净工作台:也称为净化台被分成侧线物流,DC型三大类,以及流出。

  无菌操作:一般储物柜,手术室和三个部分之间的缓冲。手术室和洁净台放置在二氧化碳培养箱,离心机,倒置显微镜。缓冲器可被放置在冰箱,冰箱和其它无菌物品良好的消毒效果之间。

  手术室:普通培养箱,离心机,水浴,设定时钟,而普通的常规分析的其平衡

  消毒间洗:烤箱,消毒器,酸和蒸馏水槽与其它处理器。

  客房分析:显微镜,计算机和打印机等。

  培养器皿

  细胞培养容器通常具有烧瓶,盘,陪替氏培养皿。随时使用三倍量的量。用具应选择好透明性,无毒,促进细胞粘着和材料的生长,材料常用于一次性聚苯乙烯制品或玻璃制品中性硬度使用。常用的容器是以下类别。

  储液瓶:装置,用于存储各种液体配制的培养液,血清等,常用规格500毫升,250毫升,100ml以下,如几。

  烧瓶:培养瓶中以不同的形式被观察到变化,将细胞传代培养在权利要求烧瓶均匀厚度书细胞,并促进粘附细胞的生长,与瓶的大小一致的是,一般按不直径小于1cm到种细胞培养的要求,允许吸管伸入瓶,规格200毫升,100ml以下,50毫升,25毫升,10毫升,的任何部分,例如几。

  菜肴:对于露地栽培和其他用途。直径30mm的60毫米较,120mm等几种。

  吸管:常用的长和短的稻草麦秆两大类,长稻草也称为刻度吸管。上部管它已修改后球,所述改进的吸管刻度,刻度吸管用于移动液体。1毫升和两种常见的10毫升。短吸管也叫滴管,肘部和直第一个两分。

  离心管:管是最广泛使用的细胞培养容器中,根据各种不同的形式使用,常用

  具有大的腹部圆锥形离心管中,两个普通锥形离心管细胞培养物离心管。前者是50毫升,30毫升,15毫升;10mL与后者更5毫升.

  其它:如三角烧瓶,烧杯,量筒,漏斗,注射器等。

  细胞培养温度

  维持培养的细胞生长旺盛恒标自动化,必须有一个恒定的和合适的温度。不同类型的细胞培养物或不同温度要求的。标准人细胞培养温度为36.5℃±0.5℃,从该温度范围内的情况下,细胞的正常代谢的影响,或甚至死亡。培养细胞比对于高温强度,不超过39℃的容差的温升低,细胞代谢是成正比的温度;人类细胞1小时39-40℃下.]C,I.e,可以收到一定的伤害,所以还是有可能恢复;在40-41℃1小时,细胞通常会被损坏,也能够仅回收小一半;41-42℃1小时,将细胞严重破坏,大部分细胞死亡,单个细胞仍有可能恢复;当温度为43℃1小时以上,所有的细胞死亡。反之,当温度不低于0℃时,虽然对细胞代谢的影响,但不会损害作用;25-35度.]c当细胞成,细胞可以存活和生长,但减慢;在4号℃小时后,再回到37℃,细胞可以继续生长。细胞新陈代谢减慢随着温度的降低。当温度降至低于冰点

  下一个,将细胞的细胞质中,可能是由于冷冻损伤和死亡。但是,如果加到肉汤冷冻保护剂的量

  (二甲亚砜或甘油),或者它可以是如-80℃-6℃下.]C(液氮)长期储存在深低温。

  合适的气氛

  气体是用于哺乳动物细胞培养中,期望的氧气和二氧化碳气体主要生存的必要条件之一。在氧的柠檬酸循环参与,以产生供给到用于合成所需的细胞增殖和细胞生长的能量的各种部件。将细胞通常为95%空气和5%二氧化碳混合气体气氛时开放培养。既是细胞代谢物,还需要用于再现部件,其在细胞培养物中主要作用是维持培养基的pH二氧化碳的细胞生长。大多数细胞是合适的pH7.2-7.如图4所示,在此范围内的细胞培养的偏差将不利地影响。然而,耐酸细胞中比耐碱性的在酸性环境更有利于细胞生长的数量多。然而,一些样细胞生长微碱性的环境中,如成纤维细胞是最合适的pH为7.4-7.6.每个单元有其最适pH

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